Требуется инженерная фантазия

[progenes]

Мы тут уже сломали мозги, может у кого есть свежие оригинальные неожиданные сумасшедшие идеи.

Есть примерно такая пробирочка. Маленькая.



В пробирку добавляется сначала одна фаза, на нее наслаивается другая фаза, содержащая радиоактивную пробу, а на самый верх третья фаза, признаюсь - это пластиды. Центрифугируем. Пластиды проходят первую фазу, "глотают" радиоактивную метку и опускаются на дно в виде осадка. Теперь мне надо как-то этот осадок пластид отсосать так, чтобы не отхлебнуть верхнюю фазу.

Пробирки вот такого размера:



Мы тут пробуем колоть иглой снизу и сбоку, но не получается. Может есть еще какие-то хитрые подходы?

UPD: Не зря спросила, вот не зря! Пока навскидку сразу предложили два метода - заморозить и отрезать или вставить в насадку на пипетку иглу и отсосать. Завтра пробуем с краской.
Счет 11:4 в пользу У-хромосомы. уууууу!!!

UPD2: Всем огромное спасибо за советы. Узнала много нового и интересного. Лучше всего подошел метод замораживания - отрезания. freedom_of_sea в благодарности!

Comments

[sergepolar.livejournal.com]

А нельзя в начале отсосать всю верхнюю фазу?

заморозить

[freedom_of_sea.livejournal.com]

и отрезать нужный слой

[progenes.livejournal.com]

Можно, но все-равно остается на стенках. Это раствор радиоактивно-меченой глюкозы, ее так просто полностью фиг отосешь. Там потом буквально одна капля на нижней фазе зависает и за ней надо пипеткой "гоняться".

[aosypov.livejournal.com]

Слей верхнюю фазу нахрен в соседнюю пробирку, соскреби пластиды?!

Re: заморозить

[progenes.livejournal.com]

Это идея!!! В азот и скальпелем. Попробуем!

[aosypov.livejournal.com]

Промыть пару раз чистой верхней фазой?

Re: заморозить

[sergepolar.livejournal.com]

Эх, была такая идея, да думал, что в биологии поморозишь - убьешь :)

[melkiythegreat.livejournal.com]

Сверху то пробовали?

[aosypov.livejournal.com]

Одну каплю можно отсосать фильтровашкой - вырезать узкий лепесток.

[aosypov.livejournal.com]

пластиды передохнут

[progenes.livejournal.com]

Это попробуем, если уже ничего не получится. Там и так объем небольшой, каждый дополнительный шаг добавляет ошибки, хотя это тоже вариант.

[progenes.livejournal.com]

Да пусть дохнут, нам и так их оттуда прямо в сцинтиллятор.

[an-embrace.livejournal.com]

А обязательно иголкой отбирать? Просто подумалось, если носик обычной эппендорфовской пипетки заткнуть, скажем, капилляром или какой мелкой стеклянной трубочкой, а как носик пройдет сквозь ненужные фазы и погрузится в нужную, вынуть ту трубочку, "надеть" на носик пипетку и отобрать желаемую жидкость. В этом случае контакт ненужной фазы с носиком пипетки будет только снаружи. Ну и чуть-чуть того, что в силу поверхностного натяжения потянулось за носиком в нужную фазу.

[progenes.livejournal.com]

так сверху все-равно надо проходить радиоактивный слой.

[rempel.livejournal.com]

Phase lock - такой гель, разделяет фазы с разной плотностью.
Мы с его помощью раньше ДНК выделяли.
У них было 2 или 3 варианта с разной плотностью - может, одна из них для пластид подойдет.
https://www.google.com/webhp?sourceid=chrome-instant&ion=1&ie=UTF-8#sclient=psy-ab&q=phase+lock+centrifuge&oq=phase+lock+centrifuge&gs_l=hp.3...5604.10571.2.10765.8.8.0.0.0.0.107.657.7j1.8.0...0.0.0..1c.1.17.psy-ab.MYDEoF3uBx8&pbx=1&bav=on.2,or.r_cp.r_qf.&bvm=bv.48705608,d.dmg&fp=2801615ddb411326&ion=1&biw=1161&bih=715

[progenes.livejournal.com]

о, не знала о таком. Надо почитать, пролезет ли пластида через него. Спасибо, вообще вещь полезная, не для этого, так для другого.

[progenes.livejournal.com]

Решено, завтра попробуем - расскажу.

[zloradskij.livejournal.com]

Предлагаю проколоть иглой дюрочку заранее и заткнуть кусочком проволоки. потом выдернуть.

[gsm-sms.livejournal.com]

заморозить, откусить холодными же кусачками (по типу маникюрных) или триммером (тоже маникюрным)

[progenes.livejournal.com]

Прикинь, а если эта проволочка в процессе центрифугирования вываливается или неплотно затыкается? Сдавать центрифугу в Чернобыль на металлолом?

[geterogen.livejournal.com]

нужно между осадком и жидкостью образовать пузырёк воздуха, через который осадок и высасывать

[dr-blastarr.livejournal.com]

Добавлю к этому способу, что в пипетку, опущенную до нужной фазы, можно вставить шприц и высосать всё, что надо. В этом случае контакта с другими фазами вообще не будет.

[penetrat0r.livejournal.com]

Булькнуть пузырьком воздуха в средней фазе, проходя сверху? Или недостаточно гарантирована степень очистки пробы от верхней в этом случае?

[progenes.livejournal.com]

О! Тоже прекрасная идея! И это попробуем.

Какие ж вы тут все молодцы!

[freedom_of_sea.livejournal.com]

тоже возникла такая мысль, но моё дело прокукарекать, а там хоть не рассветай :-)