![[personal profile]](https://www.dreamwidth.org/img/silk/identity/user.png){kind=small}
progenesЯ думаю, это должно быть интересно, посмотреть под руки лабораторным трудящимся и понаблюдать за рутинным процессом выделения ДНК из растений. Итак, выделение ДНК в
Сначала ми идем в теплицу и выбираем себе жертву. Отрываем у нее несколько листочков и возвращаемся в лабораторию.
Затем одеваем резиновые перчатки. Во-первых, это красиво, во-вторых, таким образом мы защищаем свои руки от химреактивов.
Берем ступку, наливаем в нее жидкого азота, опускаем туда свежесорваный листочек и растираем по возможности в пыль и добавляем немного (приблизительно 500 микролитров) экстракционного раствора. Раствор для экстракции содержит поваренную соль и детергенты (такие, как в стиральном порошке), а белки выпадают в осадок.
Переносим суспензию в маленькую пробирку, которая на лабораторном сленге называется эппендорф. Теперь нам надо основательно осадить, все что выпало в осадок: белки и обломки клетки.
Для этого нам понадобится центрифуга, куда мы вставляем эппендорфы с растительным экстрактом ДНК. Закрываем и нажимаем кнопочку. Центрифуга раскручивается до 13000 оборотв в минуту и все, что не растворилось в экстракционном растворе, осаждается на дно эппендорфа.
А над осадком будет раствор ДНК, который мы осторожно отбираем пипеткой и выливаем в стаканчик со спиртом. ДНК в спирте выпадает в осадок в виде сопли (простите за сравнение, но из песни слова не выкинешь).
Ее вполне можно намотать на стекляную палочку и полюбоваться. Но это скорее для демонстрации изумленной публике. А потом эту соплю мы опускаем в чистый эппендорф и откручиваем на центрифуге еще раз. На этот раз осадок это как раз то, что нам нужно. То есть относительно чистая ДНК.
Мы отбираем пипеткой остатки спирта, подсушиваем осадок и растворяем в 50 микролитрах воды. Эппендорф подписываем и ставим в коробочку в холодильник на минус 80°C до следующего опыта.
Домашнее задание: Выделение ДНК из клубники в домашних условиях.
Контрольные вопросы:
Что это за сопля на палочке:
1. Кто-то неудачно чихнул?
2. Раствор зарос грибом?
3. ДНК!
Вопросы для размышления:
1. А где РНК?
2. А если я посмотрю это под микроскопом то увижу хромосомы как на картинке?
3. Ну и где тут гены?
4. А если выделить не из листочка, а из цветка, то это будет какая-то другая ДНК?
5. Для того, чтоб выделить ДНК из меня, мне что, пальчик отрубить и растереть?
Завтра будем измерять концентрацию и разглядывать ДНК в ультрафиолете.
Сначала ми идем в теплицу и выбираем себе жертву. Отрываем у нее несколько листочков и возвращаемся в лабораторию.
Затем одеваем резиновые перчатки. Во-первых, это красиво, во-вторых, таким образом мы защищаем свои руки от химреактивов.
Берем ступку, наливаем в нее жидкого азота, опускаем туда свежесорваный листочек и растираем по возможности в пыль и добавляем немного (приблизительно 500 микролитров) экстракционного раствора. Раствор для экстракции содержит поваренную соль и детергенты (такие, как в стиральном порошке), а белки выпадают в осадок.
Переносим суспензию в маленькую пробирку, которая на лабораторном сленге называется эппендорф. Теперь нам надо основательно осадить, все что выпало в осадок: белки и обломки клетки.
Для этого нам понадобится центрифуга, куда мы вставляем эппендорфы с растительным экстрактом ДНК. Закрываем и нажимаем кнопочку. Центрифуга раскручивается до 13000 оборотв в минуту и все, что не растворилось в экстракционном растворе, осаждается на дно эппендорфа.
А над осадком будет раствор ДНК, который мы осторожно отбираем пипеткой и выливаем в стаканчик со спиртом. ДНК в спирте выпадает в осадок в виде сопли (простите за сравнение, но из песни слова не выкинешь).
Ее вполне можно намотать на стекляную палочку и полюбоваться. Но это скорее для демонстрации изумленной публике. А потом эту соплю мы опускаем в чистый эппендорф и откручиваем на центрифуге еще раз. На этот раз осадок это как раз то, что нам нужно. То есть относительно чистая ДНК.
Мы отбираем пипеткой остатки спирта, подсушиваем осадок и растворяем в 50 микролитрах воды. Эппендорф подписываем и ставим в коробочку в холодильник на минус 80°C до следующего опыта.
Домашнее задание: Выделение ДНК из клубники в домашних условиях.
Контрольные вопросы:
Что это за сопля на палочке:
1. Кто-то неудачно чихнул?
2. Раствор зарос грибом?
3. ДНК!
Вопросы для размышления:
1. А где РНК?
2. А если я посмотрю это под микроскопом то увижу хромосомы как на картинке?
3. Ну и где тут гены?
4. А если выделить не из листочка, а из цветка, то это будет какая-то другая ДНК?
5. Для того, чтоб выделить ДНК из меня, мне что, пальчик отрубить и растереть?
Завтра будем измерять концентрацию и разглядывать ДНК в ультрафиолете.
Tags:
![[identity profile]](https://www.dreamwidth.org/img/silk/identity/openid.png){kind=small}
nu chesno nihto v molec labi ne nosyt' halaty nikagda....
Date: 2007-07-09 07:33 am (UTC)fenol ob shtanci -a sho robyat' shtanci pid vytyazhkoyu??
Eth Br xixixi ce treba sdelat' pytki v lageryah dlya cellbiologystov -a nu govori infu a to budesh oblyzyvat' EthBr container)))
Re: nu chesno nihto v molec labi ne nosyt' halaty nikagda....
Date: 2007-07-09 09:41 am (UTC)